發(fā)布日期:2009-12-07 信息來源:admin
柱上檢測(cè)常見于現(xiàn)代分析實(shí)驗(yàn)室中毛細(xì)管色譜。在大多數(shù)情況下,熔融石英毛細(xì)管的聚酰亞胺涂層需要去掉才能用于分析檢測(cè)。我們?cè)诖藢⒂懻撊サ艟埘啺返姆椒?、?qiáng)度比較和檢測(cè)窗口的光學(xué)清潔度。
使用聚酰亞胺涂層石英毛細(xì)管的色譜儀器一直是現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室重要組成部分。許多這類儀器采取石英的光學(xué)透過特性,用于柱上遠(yuǎn)紫外的吸收檢測(cè)。甚至更常用于柱上LIF檢測(cè)。沒有地方比毛細(xì)管電泳如DNA測(cè)序更常用。
柱上檢測(cè)窗口,通常有2-6mm長(zhǎng),是通過截去毛細(xì)柱出口附近的一小截聚酰亞胺涂層制成的。這個(gè)過程稱為開窗,其產(chǎn)品稱為開窗毛細(xì)管。不管檢測(cè)方案如何,只有兩種方案能夠基本符合產(chǎn)品性能要求。首先,毛細(xì)管必須保持足夠的機(jī)械強(qiáng)度以用于日常處理并安裝入檢測(cè)器。其次,熒光應(yīng)用中的特殊重要性,是窗口的清潔度。殘余的聚酰亞胺會(huì)增加儀器背景噪音,并因此降低信噪比而影響檢測(cè)靈敏度。
以下我們將討論各種常見的去掉聚酰亞胺的方法,測(cè)定各種方法的抗拉強(qiáng)度和對(duì)應(yīng)的背景熒光。
實(shí)驗(yàn)
為消除批次之間的差別,所有開窗毛細(xì)管樣品都是同一批生產(chǎn)的TSP050375 (Polymicro)。進(jìn)行如下5種開窗技術(shù)研究:
1.紫外激光開窗機(jī)(Polymicro標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)過程);
2.一種加熱絲裝置
3.硫酸(Fisher)加熱至130°C
4.等離子體炬(PVA Tepla)
5.丁烷火焰
所有窗口長(zhǎng)度為4-6mm并位于2米長(zhǎng)毛細(xì)管中心位置。每種技術(shù)至少要做20個(gè)樣品試驗(yàn)。
相關(guān)背景熒光是在310基因分析儀(ABG)上進(jìn)行,每套樣品至少要做5個(gè)樣品試驗(yàn)??箯垙?qiáng)度是在Instron 3340 (Instron)上進(jìn)行,每套樣品至少要做20個(gè)樣品試驗(yàn)。所有樣品使用拉伸速度是10”/min,拉伸長(zhǎng)度0.5m.
結(jié)果
圖中總結(jié)了所有試驗(yàn)收集的數(shù)據(jù),顯示的是平均值。表明窗口強(qiáng)度的相關(guān)變化。數(shù)據(jù)建議,激光對(duì)玻璃表面產(chǎn)生的傷害最小并產(chǎn)生最強(qiáng)窗口。
結(jié)論
本說明比較了5種毛細(xì)管開窗技術(shù)。激光技術(shù)提供了最好的性能。